一 、实验背景：微针贴片
1. 微针（Microneedles，MN）是一种新型的物理促透技术，由多个微米级的细小针尖以阵列的方式连接在基座上组成，针体一般高10－2000微米、宽10－50微米。微针的长度、大小和形状可根据治疗的需求进行个体化设计。微针能定向穿过角质层，产生微米尺寸的机械通道，将药物直接置于表皮或上部真皮层，不用通过角质层即可参与微循环，发挥药理反应。
图1引用自：Small. 2025 Jan;21(3):e2409121.
2. 微针递送药物时将活性成分装载于微针阵列中，药物与皮下组织液之间的浓度梯度形成驱动力，致使药物缓慢释放进入体内，除了具有经皮递送系统的优势外，还有如下优势：
（1）透皮吸收速率稳定；
（2）控制微针长度可避免触及毛细血管和神经末梢，降低或消除疼痛感；
（3）给药方式便捷，可自行使用。
二 、实验场景：Z-stack——3D重构
1. Z-stack（Z 层堆叠、Z 轴序列扫描）是共聚焦激光扫描显微镜的三维成像采集技术：沿样品Z 轴（垂直于玻片 / 物镜的轴向，深度方向），以固定步长逐层采集多张不同焦平面的二维共聚焦切片图像（单张切片叫 Z-slice），一整套连续深度切片合集即为 Z-stack 堆栈。
2. 使用步骤
Z轴层扫：拍摄方式可选手动设置起始坐标和终点坐标，灵活框选层扫范围，设置扫描时Z轴步长大小或者扫描步数，注意:步长越小、扫描步数越大，扫描越精细，成效效果越好。
3D重构：在Z轴层扫之后，软件内会出现“3D”按钮，点击该按钮即可进入新界面并对拍摄样品自动重构。
三、用户微针贴片观察效果
本次实验中，用户对微针载体和药物分别染色，药物由488nm激光激发，载体由561nm激光激发，先使用10X物镜侧面观察微针整体情况，再切换至20X物镜进行Z-stack层扫并3D重构。
本次实验，3D重构不同视角示意图。图中绿色高亮部分为搭载的药物聚集体。
Z-stack拍摄条件
显微镜：NCF1000激光共聚焦显微镜
物镜：20X （NA = 0.75）
分辨率：1024 X 1024像素
激光通道：488nm，561nm
层扫步数：120
单图拍摄条件
显微镜：NCF1000激光共聚焦显微镜
物镜：10X（N.A.=0.45）
分辨率：2048 X 2048像素
激光通道：488nm，561nm
四 、实验过程中可能遇见的问题
Q1：使用凝胶材质微针时，微针融化变软怎么办
A1：对于在拍摄过程中，微针状态会发生变化的情况时，可以将微针放置于盖玻片上，凭借自身的粘性倒置观察。
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